冷原子熒光測汞儀測定尿液中的汞
尿汞的測定目前尚無統(tǒng)一的國家標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法，大多仍采用冷原子吸收法，這種方法用空氣作為載氣，以汞原子對特征譜線的吸收程度定量，雖有儀器簡單，成本低廉的優(yōu)點(diǎn)，但靈敏度較低，且易造成室內(nèi)空氣污染。氫化物一原子熒光光譜法有很高的靈敏度和準(zhǔn)確度，并能同時(shí)測定多種元素，但儀器昂貴，目前尚不能在基層普及。采用冷原子熒光測汞儀檢測尿樣中的汞，兼有以上兩種方法的優(yōu)點(diǎn)。
1 材料與方法
1．1 原理尿液經(jīng)高錳酸鉀和硫酸消化后，尿液中的汞被氧化為離子狀態(tài)的汞，用氯化亞錫將汞離子還原為汞蒸氣，由普通氬氣送入熒光池，吸收低壓汞燈發(fā)出的紫外光，使汞原子被激發(fā)而產(chǎn)生熒光，經(jīng)光電倍增管放大，由記錄儀記錄峰值，從而測得樣品中的汞含量。
1．2 儀器
1．2．1 ZYG-II型智能冷原子熒光測汞儀(杭州大吉光電儀器有限公司制造)。
1．2．2 恒溫水浴箱，恒溫干燥箱。
1．2．3 注射器lml，50ul，100ul。
1．2．4 容量瓶100ml，250ml。
1．2．5 1ml、10ml移液管；lml、5ml刻度吸管；10ml比色管。
1．3 試劑實(shí)驗(yàn)用水為去離子水；除特別注明外，所有試劑均為優(yōu)ji純。
1．3．1 汞標(biāo)準(zhǔn)貯備液(1000ug/m1) 由國家標(biāo)物中心提供。
1．3．2 汞保存液稱取0.1g重鉻酸鉀溶于1L5+95硝酸溶液中。
1．3．3 濃硫酸。
1．3．4 高錳酸鉀溶液30g/L。
1．3．5 氯化亞錫(A．R)溶液 稱取氯化亞錫20g，用20ml濃鹽酸溶解后用水稀釋至100ml，臨用時(shí)配制。
1．3．6 鹽酸羥胺(A．R)溶液200g/L。
1．4 實(shí)驗(yàn)條件
1．4．1 氣源普通氬氣；載氣流量：40ml/min；屏蔽氣流量：500ml/min；負(fù)高壓：480V。
1．5 分析步驟
1．5．1 樣品處理取lOOml晨尿于塑料瓶中，加入2ml濃硝酸于室溫可保存9d。
(1)冷消化 取2ml尿樣于10ml比色管中，加入0.5ml濃硫酸，搖勻后放置10min。加入高錳酸鉀溶液1.5ml，搖勻后放置30min。逐滴加入鹽酸羥胺溶液至紫色褪盡，振搖100次，加汞保存液至10ml，放置20min，用lml注射器取lml樣品進(jìn)樣分析。
(2)熱消化 步驟與冷消化相同，不同處僅在加入高錳酸鉀溶液并搖勻后立即放人70℃恒溫水浴中30min，以后處理同冷消化。
1．5．2 空白試驗(yàn) 取去離子水2mI，同尿樣冷消化處理方法。
1．5．3 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線用汞保存液將汞標(biāo)準(zhǔn)貯備液分次稀釋至40ug/L，用微量進(jìn)樣器分別吸取0、10、20、30、40、50、100ul進(jìn)樣分析，其Hg的含量依次為0、0.4、0.8、1.2、1.6、2、4ng，記錄峰高，將Hg的含量和對應(yīng)的峰高代入直線回歸方程計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線。
1．5．4 結(jié)果計(jì)算
X= C/V×10
X一尿液中Hg 的濃度， ug/L；
c-測得的樣品中的Hg 含量，ng；
V一尿樣體積，ml。
2 結(jié)果與討論
2．1 線性范圍、標(biāo)準(zhǔn)曲線及檢測限
2．1．1 在設(shè)定條件下本方法的線性范圍為0—4ng，過高濃度的Hg 會污染儀器，影響以后低含量樣品的測定。
2．1．2 每天作1次標(biāo)準(zhǔn)曲線，連作6d得到6條標(biāo)準(zhǔn)曲線。相關(guān)系數(shù)(r)≠0.9990一O.9998，斜率(b)121—133，截距(a)≠4.8-4.4。
2．1．3 以2ml水消化處理后作空白試驗(yàn)，每天作6管，連作6d，得到36個(gè)峰高值，平均峰高為70，標(biāo)準(zhǔn)差(S)為5．9，RSD％=8.4，以3倍標(biāo)準(zhǔn)差的峰高值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線求得檢測限為0.73ug/L(取樣2ml時(shí))。
2．2 冷消化法與熱消化法的對比試驗(yàn) 取l2支比色管，分別加入同一份尿樣2ml，6支比色管用冷消化法，另6支比色管用熱消化法，結(jié)果見表1。
表1 冷熱消化方法對比試驗(yàn)結(jié)果
經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，兩者結(jié)果無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的差別，因此采用冷消化法為簡單。
2．3 精密度試驗(yàn)在線性范圍內(nèi)，選擇高、中、低3個(gè)濃度，每個(gè)濃度測定6次，結(jié)果見表2。
表2 精密度試驗(yàn)結(jié)果(n=6)
2．4 準(zhǔn)確度試驗(yàn)選擇3種不同濃度的尿樣，分別加入相近量的標(biāo)準(zhǔn)溶液，進(jìn)行高中低濃度的加標(biāo)回收試驗(yàn)，結(jié)果見表3。
2．5 注意事項(xiàng)
2．5．1 該方法進(jìn)樣體積小，靈敏度高，所用玻璃儀器bi須徹底洗干凈，實(shí)驗(yàn)前應(yīng)用20％的硝酸浸泡24h以上，如需急用，可用1：1熱硝酸或硫酸一高錳酸鉀混合液浸泡30min。清洗后的玻璃容器要在恒溫干燥箱中120℃干燥2-4h。特別是用于標(biāo)準(zhǔn)系列的容器。不僅要清洗干凈，每次測定中還要保持階梯次序不變。
2．5．2 氣體和煙霧對測定影響很大，所以進(jìn)樣時(shí)要緩緩滴加。不能猛推；在滴加鹽酸羥胺后要振搖，并放置20—30min。
2．5．3 本次冷熱兩種消化方法的對比試驗(yàn)是在環(huán)境溫度為22℃ 一28℃下進(jìn)行的，如果低于該溫度，則應(yīng)用熱消化法或重新進(jìn)行對比試驗(yàn)。
2．5．4 如果樣品中汞濃度高于20ug/L，可減少取樣量。